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中华实验和临床感染病杂志(电子版)

中华实验和临床感染病杂志(电子版) ›› 2020, Vol. 14 ›› Issue (04) : 278 -283. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-1358.2020.04.003

所属专题： 文献；

论著

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP突变/准种与HBeAg和HBV DNA的关系
鲁俊锋1, 李金娥1, 柳雅立1, 金怡1, 马丽娜1, 胡中杰1, 陈新月1,†()   
  1. 1. 100069　北京，首都医科大学附属北京佑安医院肝病中心一科
  • 收稿日期:2019-11-24 出版日期:2020-08-15
  • 通信作者: 陈新月
  • 基金资助:
    "十三五"国家科技重大专项课题(No. 2017ZX10201021-001-008、2017ZX10202202-005-010、2017ZX10202201); 青海省重点研发与转化计划(No. 2017-SF-159)

Relationship between HBV pre-C/BCP mutation/quasispecies and HBeAg and HBV DNA in HBeAg positive patients with chronic hepatitis B

Junfeng Lu1, Jin’e Li1, Yali Liu1, Yi Jin1, Lina Ma1, Zhongjie Hu1, Xinyue Chen1,†()   

  1. 1. Department of Hepatology, Beijing You’an Hospital, Capital Medical University, Beijing 100069, China
  • Received:2019-11-24 Published:2020-08-15
  • Corresponding author: Xinyue Chen
  • About author:
    Corresponding author: Chen Xinyue, Email:
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引用本文：

鲁俊锋, 李金娥, 柳雅立, 金怡, 马丽娜, 胡中杰, 陈新月. HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP突变/准种与HBeAg和HBV DNA的关系[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2020, 14(04): 278-283.

Junfeng Lu, Jin’e Li, Yali Liu, Yi Jin, Lina Ma, Zhongjie Hu, Xinyue Chen. Relationship between HBV pre-C/BCP mutation/quasispecies and HBeAg and HBV DNA in HBeAg positive patients with chronic hepatitis B[J]. Chinese Journal of Experimental and Clinical Infectious Diseases(Electronic Edition), 2020, 14(04): 278-283.

目的

探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎（eP-CHB）HBV前C/BCP突变/准种及其与HBeAg、HBV DNA水平的关系。

方法

采用断面研究对2016年1月至2018年12月就诊于首都医科大学附属北京佑安医院的220例eP-CHB患者进行前C/BCP突变检测，其中24例患者进行前C/BCP区扩增、克隆，同步检测血清HBeAg和HBV DNA水平，分析前C/BCP突变/准种的发生情况及其与HBeAg和HBV DNA水平的关系。

结果

220例eP-CHB患者中，HBV前C/BCP总突变率为70.0%（154/220），前C/BCP共同突变率为18.2%（40/220），前C突变率为30.9%（68/220），BCP突变率为57.3%（126/220）。HBV DNA≥ 5 lgIU/ml患者上述4种突变检出率均高于HBV DNA< 5 lgIU/ml者，其中前C/BCP总突变和BCP突变患者差异有统计学意义（χ2 = 5.809、P = 0.016，χ2 = 5.081、P = 0.024）。HBeAg水平越低（< 500 COI、500～1 000 COI和> 1 000 COI共3组患者比较），以上4种突变检出率越高，差异有统计学意义（χ2 = 31.738、17.291、16.263、22.164，P均< 0.001）。HBV DNA≥ 5 lgIU/ml患者中，HBeAg水平越低，以上4种突变检出率越高，差异亦均有统计学意义（χ2 = 40.503、19.654、16.727、29.119，P < 0.001）。准种检测中，前C区高突变组患者HBeAg水平低于低突变组，差异有统计学意义（t = 2.230、P = 0.017），前C、BCP高突变组与低突变组间HBV DNA水平差异无统计学意义（t = 0.624、P = 0.462，t = 0.893、P = 0.317）。

结论

eP-CHB患者中仍存在广泛的前C/BCP突变。高HBV DNA、低HBeAg表达者，前C和BCP突变的发生率较高；前C区突变株在准种中比率高者更影响HBeAg的表达。推测前C/BCP突变可能是eP-CHB出现低HBeAg、高HBV DNA，并导致抗病毒治疗停药后易复发的原因。

关键词: 乙型肝炎病毒e抗原, HBV DNA, 肝炎，乙型, 前C/BCP区突变, 准种
Objective

To investigate the pre-C/BCP mutation and quasispecies in patients with hepatitis B virus e antigen (HBeAg) positive (eP-CHB) and the relationship with the levels of HBeAg and HBV DNA.

Methods

The pre-C/BCP mutation was detected in 220 patients with eP-CHB from January 2016 to December 2018 admitted in Beijing You’an Hospital, Capital Medical University by cross-sectional study. Among whom, the pre-C/BCP region in 24 patients was amplified and cloned. Serum HBeAg and HBV DNA levels were detected simultaneously. The pre-C/BCP mutation and quasispecies and the relationship with HBeAg and HBV DNA levels were analyzed, respectively.

Results

Among the 220 patients with eP-CHB, total mutation rate of pre-C/BCP was 70.0% (154/220), co-mutation rate of pre-C/BCP was 18.2% (40/220) and mutation rate of pre-C and BCP were 30.9% (68/220) and 57.3% (126/220), respectively. The detection rates of the above four mutations in patients with HBV DNA ≥ 5 lgIU/ml were all higher than those of patients with HBV DNA < 5 lgIU/ml, the rates of BCP mutation and pre-C/BCP total mutation were significantly different (χ2 = 5.809, P = 0.016; χ2 = 5.081, P = 0.024). The lower HBeAg level was (< 500 COI, 500-1 000 COI and > 1 000 COI), the higher detection rates of the above four mutations were, all with significant difference (χ2 = 31.738, 17.291, 16.263, 22.164; all P < 0.001). Similarly, among the cases with HBV DNA ≥ 5 lgIU/ml, the detection rates of the above four mutations were higher among the cases with lower HBeAg level, with significant differences (χ2 = 40.503, 19.654, 16.727, 29.119; all P < 0.001). In quasispecies detection, HBeAg level of cases with high mutation of the pre-C region was lower than that with low mutation, with significant difference (t = 2.230, P = 0.017). There was no significant difference between HBV DNA levels of cases with high mutation and low mutation of the pre-C region (t = 0.624, P = 0.462) and BCP (t = 0.893, P = 0.317).

Conclusions

There were still extensive pre-C/BCP mutations in eP-CHB. The mutation rates of pre-C and BCP were higher in patients with high HBV DNA and low HBeAg level. The high proportion of pre-C mutants in quasispecies had more influence on HBeAg expression. Combined with the previous studies, it was speculated that the pre-C/BCP mutation may be the cause of low HBeAg and high HBV DNA in eP-CHB and lead to the recurrence after withdrawal of antiviral therapy.

Key words: Hepatitis B virus e antigen, HBV DNA, Hepatitis B, Pre-C/basal core promoter mutation, Quasispecies
表1 eP-CHB中前C和BCP区突变检测
突变类型 例数 检测率（%）
无突变 66 30.0
单前C突变 28 12.7
单BCP突变 86 39.1
前C/BCP共同突变 40 18.2
合计 220 100.0
表2 HBV DNA水平与前C/BCP突变[例（%）]
突变类型 HBV DNA水平 χ 2值 P值
< 5 lgIU/ml（31例） ≥ 5 lgIU/ml（189例）
前C突变 7（22.6） 61（32.3） 1.172 0.279
BCP突变 12（38.7） 114（60.3） 5.081 0.024
前C/BCP共同突变 3（9.7） 37（19.6） 1.152 0.283
前C/BCP总突变 16（51.6） 138（73.0） 5.809 0.016
表3 HBeAg水平与前C/BCP突变[例（%）]
突变类型 HBeAg（COI） χ 2值 P值
< 500（111例） 500～1 000（42例） > 1 000（67例）
前C突变 48（43.2） 9（21.4） 11（16.4） 16.263 < 0.001
BCP突变 78（70.3） 25（59.5） 23（34.3） 22.164 < 0.001
前C/BCP共同突变 32（28.8） 4（9.5） 4（6.0） 17.291 < 0.001
前C/BCP总突变 94（84.7） 30（71.4） 30（44.8） 31.738 < 0.001
表4 HBV DNA≥ 5 lgIU/ml时HBeAg水平与前C/BCP突变
突变类型 HBeAg（COI） χ 2值 P值
< 500（87例） 500～1 000（38例） > 1 000（64例）
前C突变 41（47.1） 9（23.7） 11（17.2） 16.727 < 0.001
BCP突变 69（79.3） 23（60.5） 23（35.9） 29.119 < 0.001
前C/BCP共同突变 29（33.3） 4（10.5） 4（6.3） 19.654 < 0.001
前C/BCP总突变 81（93.1） 28（73.7） 30（46.9） 40.503 < 0.001
表5 24例患者HBV前C/BCP区克隆株突变
患者编号 突变类型[株（%）] 克隆株（株数）
A1762T G1764A G1896A 碱基缺失
1 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 29
2 0（0.0） 0（0.0） 16（64.0） 4（16.0） 25
3 28（100.0） 28（100.0） 0（0） 0（0.0） 28
4 17（54.8） 17（54.8） 0（0.0） 9（0.0） 31
5 0（0.0） 0（0.0） 18（72.0） 0（0.0） 25
6 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 9（36.0） 25
7 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 29（100.0） 29
8 28（96.6） 28（96.6） 26（89.7） 0（0.0） 29
9 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 27
10 0（0.0） 0（0.0） 1（3.6） 16（57.1） 28
11 19（65.5） 19（65.5） 0（0.0） 3（10.3） 29
12 0（0.0） 0（0.0） 7（25.9） 0（0.0） 27
13 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 29
14 2（7.1） 2（7.1） 23（82.1） 0（0.0） 28
15 21（75.0） 21（75.0） 0（0.0） 0（0.0） 28
16 28（96.6） 28（96.6） 17（58.6） 0（0.0） 29
17 0（0.0） 0（0.0） 16（55.2） 8（27.3） 29
18 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 22（0.0） 29
19 5（16.7） 5（16.7） 1（3.3） 1（3.3） 30
20 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 25
21 1（4.0） 1（4.0） 15（60.0） 0（0.0） 25
22 0（0.0） 0（0.0） 1（3.7） 0（0.0） 27
23 8（32.0） 8（32.0） 0（0.0） 9（36.0） 25
24 27（100.0） 27（100.0） 21（84.0） 0（0.0） 27
图1 G1896A高突变组和低突变组患者HBeAg和HBV DNA水平
图2 A1762T/G1764A高突变组和低突变组患者HBeAg和HBV DNA水平
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