宫颈上皮内病变患者人乳头状瘤病毒感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-1358.2019.04.004

目的

探讨宫颈上皮内病变（CIN）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。

方法

选择2017年2月至2018年9月于新疆自治区人民医院就诊的CIN患者共140例进行回顾性分析，根据是否感染HPV分为感染组（86例）和非感染组（54例），采用免疫组织化学方法比较两组患者T细胞CD3、CD4及CD8水平以及Treg和Th17的表达水平，采用流式细胞技术比较两组患者的外周血T细胞亚群含量（CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞的百分比）、Treg细胞和Th17细胞百分含量（CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^-Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg和CD4⁺IL17⁺Th17以及Th17/Treg比值）以及相关细胞因子[肿瘤坏死因子（TGF）-β、白细胞介素（IL）-10、IL-17和干扰素（IFN）-γ]含量的差异，应用多因素Logistic回归模型分析CIN患者感染HPV的危险因素。

结果

免疫组织化学结果显示，两组患者CIN组织中T细胞CD3、CD4和CD8的表达水平差异无统计学意义，感染组患者CIN组织中T细胞抗-FOX3（Treg）和Th17表达水平显著高于非感染组。流式细胞术检测结果显示两组患者CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞百分比差异无统计学意义（t = 0.870、1.509、0.236；P = 0.385、0.133、0.813），感染组患者CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg、CD4⁺IL17⁺ Th17以及Th17/Treg比值均显著高于非感染组（P均< 0.05）。感染组患者外周血TGF-β、IL-10和L-17均高于非感染组（t =－11.601、－42.251、－40.31，P均< 0.001），而IFN-γ低于非感染组（t = 10.316、P < 0.001）。多因素Logistic回归分析显示，CD4⁺CD25⁺ Treg（OR = 3.673、P = 0.031）、CD4⁺IL17⁺Th17（OR = 1.974、P = 0.021）和Th17/Treg（OR = 3.585、P = 0.024）均为CIN患者感染HPV的危险因素，IFN-γ（OR = 0.612、P = 0.028）为CIN患者感染HPV的保护因素。

结论

CIN患者HPV感染与Treg细胞、Th17细胞及IFN-γ因子存在相关性，HPV感染的CIN患者Treg和Th17细胞增高，IFN-γ降低。

关键词: 宫颈上皮内病变, 人乳头状瘤病毒, Th17细胞, Treg细胞, 细胞因子

Objective

To investigate the correlation of human papillomavirus (HPV) infection with Th17 cell, Treg cell and related cytokines in patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN).

Methods

Total of 140 patients with CIN in Xinjiang Autonomous Region People’s Hospital from June 2017 and May 2018 were selected and divided into infection group (86 cases) and non-infection group (54 cases), according to whether with HPV infection. The expression of CD3, CD4 and CD8 were detected by immunochemistry methods. The T cells and T cell subsets (the percentage of CD3⁺ T cell, CD4⁺ T cell and CD8⁺ T cell), the percentage of Treg cell and Th17 cell (CD4⁺CD25⁺ Treg,CD8⁺CD25⁺CD127^— Treg, CD4⁺Foxp3⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg, CD4⁺IL17⁺ Th17 and Th17/Treg) and related cytokines [transforming growth factor-β (TGF-β), IL-10, IL-17 and interferon (IFN)-γ] in the peripheral blood were compared between the two groups. The risk factors of HPV infection in CIN patients analyzed by multivariate Logistic regression model.

Results

No significant difference were found in the expression of CD3, CD4 and CD8 between the two groups. No significant difference were found in CD3⁺ T cell, CD4⁺ T cell and CD8⁺ T cell (t = 0.870, 1.509, 0.236; P = 0.385, 0.133, 0.813). The level of CD4⁺CD25⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg, CD4⁺Foxp3⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg, CD4⁺IL17⁺ Th17 and Th17/Treg in infection group were significantly higher than those of non-infection group (all P < 0.05). The levels of TGF-β, IL-10 and IL-17 were significantly higher in infection group than those of non-infection group (t =-11.601, -42.251, -40.31; all P < 0.001); but the level of IFN-γ was significantly lower in infection group than that of non-infection group (t = 10.316, P < 0.001). Multivariate Logistic regression models showed that CD4⁺CD25⁺ Treg (OR = 3.673, P = 0.031), CD4⁺IL17⁺ Th17 (OR = 1.974, P = 0.021) and Th17/Treg (OR = 3.585, P = 0.024) were all risk factors for HPV infection for patients with CIN. IFN-γ was a protective factor for HPV infection for patients with CIN (OR = 2.812, P = 0.028).

Conclusions

There were correlation between HPV infection and Th17 cell, Treg cell and IFN-γ of CIN patients. CIN patients with HPV infection had increased Th17 cell and Treg cell and decreased IFN-γ.

Key words: Cervical intraepithelial neoplasia, Human papillomavirus, Th17 cell, Treg cell, Cytokine

表1 感染组和非感染组患者的一般资料

一般资料		非感染组（54例）	感染组（86例）	统计量	P值
年龄（ ± s，岁）		45.26 ± 5.32	44.75 ± 5.34	t = 0.550	0.582
BMI（ ± s，kg/m²）		21.42 ± 2.63	21.79 ± 2.19	t =－0.899	0.369
孕次（ ± s，次）		1.45 ± 0.56	1.51 ± 0.58	t =－0.603	0.547
并发症[例（%）]		?	?	?	?
?	急性感染	0（0.00）	0（0.00）	χ² = 0.044	0.833
?	慢性感染	6（11.11）	8（9.30）	χ² = 0.003	0.953
?	高血压	4（7.40）	7（8.14）	χ² = 0.027	0.868
?	糖尿病	4（7.41）	8（9.30）	χ² = 0.006	0.936
?	心血管疾病	6（11.11）	9（10.46）	χ² = 0.025	0.872
?	其他系统肿瘤	2（3.70）	4（4.65）	χ² = 0.025	0.873
既往史[例（%）]		?	?	?	?
?	吸烟史	1（1.85）	3（3.49）	χ² = 0.001	0.964
?	饮酒史	7（12.96）	13（15.11）	χ² = 0.011	0.915
?	宫颈手术史	5（9.26）	8（9.30）	χ² = 0.084	0.771

表1 感染组和非感染组患者的一般资料

一般资料		非感染组（54例）	感染组（86例）	统计量	P值
年龄（ ± s，岁）		45.26 ± 5.32	44.75 ± 5.34	t = 0.550	0.582
BMI（ ± s，kg/m²）		21.42 ± 2.63	21.79 ± 2.19	t =－0.899	0.369
孕次（ ± s，次）		1.45 ± 0.56	1.51 ± 0.58	t =－0.603	0.547
并发症[例（%）]		?	?	?	?
?	急性感染	0（0.00）	0（0.00）	χ² = 0.044	0.833
?	慢性感染	6（11.11）	8（9.30）	χ² = 0.003	0.953
?	高血压	4（7.40）	7（8.14）	χ² = 0.027	0.868
?	糖尿病	4（7.41）	8（9.30）	χ² = 0.006	0.936
?	心血管疾病	6（11.11）	9（10.46）	χ² = 0.025	0.872
?	其他系统肿瘤	2（3.70）	4（4.65）	χ² = 0.025	0.873
既往史[例（%）]		?	?	?	?
?	吸烟史	1（1.85）	3（3.49）	χ² = 0.001	0.964
?	饮酒史	7（12.96）	13（15.11）	χ² = 0.011	0.915
?	宫颈手术史	5（9.26）	8（9.30）	χ² = 0.084	0.771

表2 两组患者外周血T细胞亚群含量及Treg和Th17细胞含量（ ± s，%）

组别	例数	CD3⁺ T	CD4⁺ T	CD8⁺ T	CD4⁺CD25⁺	CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg
感染组	86	53.11 ± 13.34	43.23 ± 9.89	30.35 ± 8.34	13.11 ± 2.34	2.55 ± 1.34
非感染组	54	55.23 ± 14.56	45.56 ± 8.21	30.69 ± 8.23	6.23 ± 2.56	1.69 ± 1.23
t值	?	0.870	1.509	0.236	－15.991	－1.621
P值	?	0.385	0.133	0.813	< 0.001	< 0.001
组别	例数	CD4⁺Foxp3⁺ Treg	CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	CD4⁺IL17⁺ Th17	Th17/Treg
感染组	86	6.33 ± 1.36	0.75 ± 0.21	3.35 ± 1.38	0.25 ± 0.11
非感染组	54	2.67 ± 1.41	0.29 ± 0.12	0.97 ± 0.61	0.12 ± 0.06
t值	?	－15.154	－16.492	－13.985	－9.036
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表2 两组患者外周血T细胞亚群含量及Treg和Th17细胞含量（ ± s，%）

组别	例数	CD3⁺ T	CD4⁺ T	CD8⁺ T	CD4⁺CD25⁺	CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg
感染组	86	53.11 ± 13.34	43.23 ± 9.89	30.35 ± 8.34	13.11 ± 2.34	2.55 ± 1.34
非感染组	54	55.23 ± 14.56	45.56 ± 8.21	30.69 ± 8.23	6.23 ± 2.56	1.69 ± 1.23
t值	?	0.870	1.509	0.236	－15.991	－1.621
P值	?	0.385	0.133	0.813	< 0.001	< 0.001
组别	例数	CD4⁺Foxp3⁺ Treg	CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	CD4⁺IL17⁺ Th17	Th17/Treg
感染组	86	6.33 ± 1.36	0.75 ± 0.21	3.35 ± 1.38	0.25 ± 0.11
非感染组	54	2.67 ± 1.41	0.29 ± 0.12	0.97 ± 0.61	0.12 ± 0.06
t值	?	－15.154	－16.492	－13.985	－9.036
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表3 两组患者外周血相关因子含量（ ± s，pg/ml）

组别	例数	TGF-β	IFN-γ	IL-10	IL-17
感染组	86	45 781.67 ± 14 276.12	8.24 ± 4.12	121.71 ± 17.86	176.81 ± 19.45
非感染组	54	22 360.45 ± 9 612.87	15.23 ± 3.76	24.67 ± 9.23	61.54 ± 17.35
t值	?	－11.601	10.316	－42.251	－40.310
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表3 两组患者外周血相关因子含量（ ± s，pg/ml）

组别	例数	TGF-β	IFN-γ	IL-10	IL-17
感染组	86	45 781.67 ± 14 276.12	8.24 ± 4.12	121.71 ± 17.86	176.81 ± 19.45
非感染组	54	22 360.45 ± 9 612.87	15.23 ± 3.76	24.67 ± 9.23	61.54 ± 17.35
t值	?	－11.601	10.316	－42.251	－40.310
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表4 CIN患者感染HPV的多因素Logistic回归分析

影响因素	B值	标准误	Wald值	P值	OR值	95%CI
CD4⁺CD25⁺Treg	1.687	0.356	3.151	0.031	3.673	1.723～5.198
CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg	0.823	0.326	1.147	0.204	2.798	1.238～3.887
CD4⁺Foxp3⁺ Treg	0.587	0.387	2.334	0.078	2.145	1.291～2.764
CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	0.675	0.397	1.786	0.141	2.359	1.526～3.823
CD4⁺IL17⁺ Th17	0.478	0.256	4.125	0.021	1.974	0.511～2.864
Th17/Treg	1.568	0.364	3.908	0.024	3.585	1.986～5.348
TGF-β	0.603	0.319	2.472	0.094	2.163	1.349～3.187
IFN-γ	－0.888	0.179	3.232	0.028	0.612	0.752～3.242
IL-10	0.503	0.253	2.965	0.064	1.108	0.675～1.921
IL-17	0.240	0.287	2.276	0.087	1.272	0.845～1.812

表4 CIN患者感染HPV的多因素Logistic回归分析

影响因素	B值	标准误	Wald值	P值	OR值	95%CI
CD4⁺CD25⁺Treg	1.687	0.356	3.151	0.031	3.673	1.723～5.198
CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg	0.823	0.326	1.147	0.204	2.798	1.238～3.887
CD4⁺Foxp3⁺ Treg	0.587	0.387	2.334	0.078	2.145	1.291～2.764
CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	0.675	0.397	1.786	0.141	2.359	1.526～3.823
CD4⁺IL17⁺ Th17	0.478	0.256	4.125	0.021	1.974	0.511～2.864
Th17/Treg	1.568	0.364	3.908	0.024	3.585	1.986～5.348
TGF-β	0.603	0.319	2.472	0.094	2.163	1.349～3.187
IFN-γ	－0.888	0.179	3.232	0.028	0.612	0.752～3.242
IL-10	0.503	0.253	2.965	0.064	1.108	0.675～1.921
IL-17	0.240	0.287	2.276	0.087	1.272	0.845～1.812

[1]	Vorobjova T, Ress K, Luts K, et al. The impact of langerin (CD207)⁺ dendritic cells and FOXP3⁺ Treg cells in the small bowel mucosa of children with celiac disease and atopic dermatitis in comparison to children with functional gastrointestinal disorders[J]. APMIS,2016,124(8):689-696.
[2]	Jung MK, Kwak JE, Shin EC. IL-17A-producing Foxp3⁺ regulatory T cells and human diseases[J]. Immune Netw,2017,17(5):276-286.
[3]	Saini C, Siddiqui A, Ramesh V, et al. Leprosy reactions show increased Th17 cell activity and reduced FOXP3⁺ Tregs with concomitant decrease in TGF-β and increase in IL-6[J]. PLoS Negl Trop Dis,2016,10(4): 592-594.
[4]	Que Y, Xiao W, Guan YX, et al. PD-L1 expression is associated with FOXP3⁺ regulatory T-cell infiltration of soft tissue sarcoma and poor patient prognosis[J]. J Cancer,2017,8(11):2018-2025.
[5]	Kim YU, Kim BS, Lim H, et al. Enforced expression of CXCR5 drives T follicular regulatory-like features in Foxp3⁺ T cells[J]. Biomol Ther(Seoul),2017,25(2):130-139.
[6]	许春伟, 张博, 薛卫成. WHO(2014)子宫颈肿瘤组织学分类[J]. 临床与实验病理学杂志,2014,30(11):1324-1326.
[7]	Becker W, Nagarkatti M, Nagarkatti PS. miR-466a targeting of TGF-β2 contributes to FoxP3⁺ regulatory T cell differentiation in a murine model of allogeneic transplantation[J]. Front Immunol,2018,9(4):688-693.
[8]	李一冰, 姚秀华. 调节性T细胞对宫颈上皮内瘤变Ⅰ级患者预后的影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报2016,34(9):35-36.
[9]	Tan YJ, Xie CX, Zhang H, et al. The clinical significance of regulatory T cells, IFN-γ and IL-4 in patients of cervical cancer[J]. Labora Med Clin,2016,22(6)356-357.
[10]	Network CGA. Integrated genomic and molecular characterization of cervical cancer[J]. Nature,2017,543(5):378-384.
[11]	Xue JS, Wang YL, Chen C, et al. Effects of Th17 cells and IL-17 in the progression of cervical carcinogenesis with high-risk human papillomavirus infection[J]. Cancer Med,2018,7(2): 297-306.
[12]	Tsikouras P, Zervoudis S, Manav B, et al. Cervical cancer: screening, diagnosis and staging[J]. J Buon,2016,21(2):320-325.
[13]	Kessler TA. Cervical cancer: Prevention and early detection[J]. Semin Oncol Nurs,2017,33(2):172-174.
[14]	Huang C, Zhou L, Chang X, et al. B7-H3, B7-H4, Foxp3 and IL-2 expression in cervical cancer: Associations with patient outcome and clinical significance[J]. Oncol Rep,2016,35(4):2183-2187.
[15]	Hui F, Dong S, Zhong Y, et al. Up-regulated microRNA-155 expression is associated with poor prognosis in cervical cancer patients[J]. Biomed Pharmacother,2016,83(5):64-69.
[16]	Shen CJ, Cheng YM, Wang CL. LncRNA PVT1 epigenetically silences miR-195 and modulates EMT and chemoresistance in cervical cancer cells[J]. J Drug Target,2017,25(7):637-641.
[17]	Enerly E, Bonde J, Schee K, et al. Self-sampling for human papillomavirus testing among non-attenders increases attendance to the norwegian cervical cancer screening programme[J]. PLoS One,2016,11(4):78-79.
[18]	Jayra J, Thales Allyrio A, Josélio M, et al. Th17 response in patients with cervical cancer[J]. Oncology Leters,201816(5):6215-6227.
[19]	Huang J, Wang L, Dahiya S, et al. Histone/protein deacetylase 11 targeting promotes Foxp3+ Treg function[J]. Sci Rep,2017,7(1):8626-8629.
[20]	Avielronen S, Rubinek T, Zadok O, et al. Klotho expression in cervical cancer: differential expression in adenocarcinoma and squamous cell carcinoma[J]. J Clin Pathol,2016,69(1):53-57.
[21]	He Y, Lin J, Ding Y, et al. A systematic study on dysregulated microRNAs in cervical cancer development[J]. Int J Cancer,2016,138(6):1312-1327.
[22]	Novalamperti E, Fanelli G, Becker PD, et al. IL-10-produced by human transitional B-cells down-regulates CD86 expression on B-cells leading to inhibition of CD4⁺ T-cell responses[J]. Sci Rep,2016,6(2):44-45.
[23]	Esterházy D, Loschko J, London M, et al. Classical dendritic cells are required for dietary antigen-mediated induction of peripheral Treg cells and tolerance[J]. Nat Immunol,2016,17(5):545-546.

[1]	赵俊杰, 王玺玉, 黄鹏飞, 张兆坤, 蒲彦川, 赵海燕. 辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡在骨关节炎的作用[J/OL]. 中华关节外科杂志(电子版), 2024, 18(02): 209-214.
[2]	钱雅君, 虞竹溪, 徐颖, 董丹江, 顾勤. 危重型新型冠状病毒感染合并侵袭性肺曲霉病的临床特征和高危因素分析[J/OL]. 中华危重症医学杂志(电子版), 2024, 17(01): 3-9.
[3]	陈腊青, 林佳佳, 毛洪刚, 童冠海, 汪梦娜, 夏红波, 刘卓, 徐海霞, 赵玉华, 张传领. 血清细胞因子及呼出气一氧化氮在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征中的临床意义[J/OL]. 中华危重症医学杂志(电子版), 2023, 16(04): 316-320.
[4]	李永浩, 高雪菲, 郭田田, 张进, 张彩针, 刘静. 肥胖合并甲状腺癌相关机制的研究进展[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2023, 17(04): 311-315.
[5]	张燕, 杨跃青, 邱峥. IgG 联合血清细胞因子对肺结核并发慢性肺曲霉菌病的诊断意义[J/OL]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2024, 17(05): 809-812.
[6]	蒋丽芳, 林冰. 桑菊清解汤联合左氧氟沙星治疗社区获得性肺炎的临床分析[J/OL]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2024, 17(03): 458-461.
[7]	傅红兴, 王植楷, 谢贵林, 蔡娟娟, 杨威, 严盛. 间充质干细胞促进胰岛移植效果的研究进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 351-360.
[8]	徐嘉愉, 张复华, 牛国敏, 梁家宝, 潘焕玉, 麦秀蕖, 杨国雷, 徐嘉良, 黄佑勇. Th1/Th2细胞因子谱在恶性血液肿瘤患者化疗后中性粒细胞缺乏伴感染的应用价值[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(03): 143-150.
[9]	阿卜杜萨拉木·图尔荪麦麦提, 吐尔洪江·吐逊, 温浩. 肝脏缺血-再灌注损伤与cGAS-STING信号通路[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(03): 394-397.
[10]	杨金涓, 夏建平. 糖尿病性黄斑水肿患者基线房水细胞因子水平评估血管内皮生长因子疗效的临床研究[J/OL]. 中华眼科医学杂志(电子版), 2023, 13(06): 350-355.
[11]	杨智钧, 谷佳, 丁聿贤, 张正奎, 于如同. 脑胶质瘤患者血清炎性因子水平与病理分级及预后的相关性[J/OL]. 中华神经创伤外科电子杂志, 2024, 10(04): 238-242.
[12]	丛黎, 马林, 陈旭, 李文文, 张亮亮, 周华亭. 改良CT严重指数联合炎症指标在重症急性胰腺炎患者胰腺感染预测及预后评估中的研究[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2024, 14(05): 432-436.
[13]	刘立业, 赵德芳. 非酒精性脂肪肝患者血清细胞因子信号转导抑制因子3、肝X受体α水平与CT影像学特征的相关性[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2023, 13(04): 211-215.
[14]	李益军, 梁兴森, 方细霞, 肖文良, 李湘, 高彦平, 李嘉, 李玲. 温针灸治疗早中期寒湿痹阻型膝骨关节炎的疗效观察[J/OL]. 中华针灸电子杂志, 2024, 13(01): 7-12.
[15]	南朝涛, 陈建, 王书鸿, 李刚, 郝俊杰. 血清细胞因子预测急性脑梗死后肺炎的价值[J/OL]. 中华卫生应急电子杂志, 2024, 10(01): 16-20.

阅读次数

全文

摘要

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Correlation of human papillomavirus infection among Th17 cell, Treg cell and related cytokines in patients with cervical intraepithelial neoplasia

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Correlation of human papillomavirus infection among Th17 cell, Treg cell and related cytokines in patients with cervical intraepithelial neoplasia