宫颈上皮内病变患者人乳头状瘤病毒感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-1358.2019.04.004

目的

探讨宫颈上皮内病变（CIN）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。

方法

选择2017年2月至2018年9月于新疆自治区人民医院就诊的CIN患者共140例进行回顾性分析，根据是否感染HPV分为感染组（86例）和非感染组（54例），采用免疫组织化学方法比较两组患者T细胞CD3、CD4及CD8水平以及Treg和Th17的表达水平，采用流式细胞技术比较两组患者的外周血T细胞亚群含量（CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞的百分比）、Treg细胞和Th17细胞百分含量（CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^-Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg和CD4⁺IL17⁺Th17以及Th17/Treg比值）以及相关细胞因子[肿瘤坏死因子（TGF）-β、白细胞介素（IL）-10、IL-17和干扰素（IFN）-γ]含量的差异，应用多因素Logistic回归模型分析CIN患者感染HPV的危险因素。

结果

免疫组织化学结果显示，两组患者CIN组织中T细胞CD3、CD4和CD8的表达水平差异无统计学意义，感染组患者CIN组织中T细胞抗-FOX3（Treg）和Th17表达水平显著高于非感染组。流式细胞术检测结果显示两组患者CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞百分比差异无统计学意义（t = 0.870、1.509、0.236；P = 0.385、0.133、0.813），感染组患者CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg、CD4⁺IL17⁺ Th17以及Th17/Treg比值均显著高于非感染组（P均< 0.05）。感染组患者外周血TGF-β、IL-10和L-17均高于非感染组（t =－11.601、－42.251、－40.31，P均< 0.001），而IFN-γ低于非感染组（t = 10.316、P < 0.001）。多因素Logistic回归分析显示，CD4⁺CD25⁺ Treg（OR = 3.673、P = 0.031）、CD4⁺IL17⁺Th17（OR = 1.974、P = 0.021）和Th17/Treg（OR = 3.585、P = 0.024）均为CIN患者感染HPV的危险因素，IFN-γ（OR = 0.612、P = 0.028）为CIN患者感染HPV的保护因素。

结论

CIN患者HPV感染与Treg细胞、Th17细胞及IFN-γ因子存在相关性，HPV感染的CIN患者Treg和Th17细胞增高，IFN-γ降低。

关键词: 宫颈上皮内病变, 人乳头状瘤病毒, Th17细胞, Treg细胞, 细胞因子

Objective

To investigate the correlation of human papillomavirus (HPV) infection with Th17 cell, Treg cell and related cytokines in patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN).

Methods

Total of 140 patients with CIN in Xinjiang Autonomous Region People’s Hospital from June 2017 and May 2018 were selected and divided into infection group (86 cases) and non-infection group (54 cases), according to whether with HPV infection. The expression of CD3, CD4 and CD8 were detected by immunochemistry methods. The T cells and T cell subsets (the percentage of CD3⁺ T cell, CD4⁺ T cell and CD8⁺ T cell), the percentage of Treg cell and Th17 cell (CD4⁺CD25⁺ Treg,CD8⁺CD25⁺CD127^— Treg, CD4⁺Foxp3⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg, CD4⁺IL17⁺ Th17 and Th17/Treg) and related cytokines [transforming growth factor-β (TGF-β), IL-10, IL-17 and interferon (IFN)-γ] in the peripheral blood were compared between the two groups. The risk factors of HPV infection in CIN patients analyzed by multivariate Logistic regression model.

Results

No significant difference were found in the expression of CD3, CD4 and CD8 between the two groups. No significant difference were found in CD3⁺ T cell, CD4⁺ T cell and CD8⁺ T cell (t = 0.870, 1.509, 0.236; P = 0.385, 0.133, 0.813). The level of CD4⁺CD25⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg, CD4⁺Foxp3⁺ Treg, CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg, CD4⁺IL17⁺ Th17 and Th17/Treg in infection group were significantly higher than those of non-infection group (all P < 0.05). The levels of TGF-β, IL-10 and IL-17 were significantly higher in infection group than those of non-infection group (t =-11.601, -42.251, -40.31; all P < 0.001); but the level of IFN-γ was significantly lower in infection group than that of non-infection group (t = 10.316, P < 0.001). Multivariate Logistic regression models showed that CD4⁺CD25⁺ Treg (OR = 3.673, P = 0.031), CD4⁺IL17⁺ Th17 (OR = 1.974, P = 0.021) and Th17/Treg (OR = 3.585, P = 0.024) were all risk factors for HPV infection for patients with CIN. IFN-γ was a protective factor for HPV infection for patients with CIN (OR = 2.812, P = 0.028).

Conclusions

There were correlation between HPV infection and Th17 cell, Treg cell and IFN-γ of CIN patients. CIN patients with HPV infection had increased Th17 cell and Treg cell and decreased IFN-γ.

Key words: Cervical intraepithelial neoplasia, Human papillomavirus, Th17 cell, Treg cell, Cytokine

表1 感染组和非感染组患者的一般资料

一般资料		非感染组（54例）	感染组（86例）	统计量	P值
年龄（ ± s，岁）		45.26 ± 5.32	44.75 ± 5.34	t = 0.550	0.582
BMI（ ± s，kg/m²）		21.42 ± 2.63	21.79 ± 2.19	t =－0.899	0.369
孕次（ ± s，次）		1.45 ± 0.56	1.51 ± 0.58	t =－0.603	0.547
并发症[例（%）]		?	?	?	?
?	急性感染	0（0.00）	0（0.00）	χ² = 0.044	0.833
?	慢性感染	6（11.11）	8（9.30）	χ² = 0.003	0.953
?	高血压	4（7.40）	7（8.14）	χ² = 0.027	0.868
?	糖尿病	4（7.41）	8（9.30）	χ² = 0.006	0.936
?	心血管疾病	6（11.11）	9（10.46）	χ² = 0.025	0.872
?	其他系统肿瘤	2（3.70）	4（4.65）	χ² = 0.025	0.873
既往史[例（%）]		?	?	?	?
?	吸烟史	1（1.85）	3（3.49）	χ² = 0.001	0.964
?	饮酒史	7（12.96）	13（15.11）	χ² = 0.011	0.915
?	宫颈手术史	5（9.26）	8（9.30）	χ² = 0.084	0.771

表1 感染组和非感染组患者的一般资料

一般资料		非感染组（54例）	感染组（86例）	统计量	P值
年龄（ ± s，岁）		45.26 ± 5.32	44.75 ± 5.34	t = 0.550	0.582
BMI（ ± s，kg/m²）		21.42 ± 2.63	21.79 ± 2.19	t =－0.899	0.369
孕次（ ± s，次）		1.45 ± 0.56	1.51 ± 0.58	t =－0.603	0.547
并发症[例（%）]		?	?	?	?
?	急性感染	0（0.00）	0（0.00）	χ² = 0.044	0.833
?	慢性感染	6（11.11）	8（9.30）	χ² = 0.003	0.953
?	高血压	4（7.40）	7（8.14）	χ² = 0.027	0.868
?	糖尿病	4（7.41）	8（9.30）	χ² = 0.006	0.936
?	心血管疾病	6（11.11）	9（10.46）	χ² = 0.025	0.872
?	其他系统肿瘤	2（3.70）	4（4.65）	χ² = 0.025	0.873
既往史[例（%）]		?	?	?	?
?	吸烟史	1（1.85）	3（3.49）	χ² = 0.001	0.964
?	饮酒史	7（12.96）	13（15.11）	χ² = 0.011	0.915
?	宫颈手术史	5（9.26）	8（9.30）	χ² = 0.084	0.771

表2 两组患者外周血T细胞亚群含量及Treg和Th17细胞含量（ ± s，%）

组别	例数	CD3⁺ T	CD4⁺ T	CD8⁺ T	CD4⁺CD25⁺	CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg
感染组	86	53.11 ± 13.34	43.23 ± 9.89	30.35 ± 8.34	13.11 ± 2.34	2.55 ± 1.34
非感染组	54	55.23 ± 14.56	45.56 ± 8.21	30.69 ± 8.23	6.23 ± 2.56	1.69 ± 1.23
t值	?	0.870	1.509	0.236	－15.991	－1.621
P值	?	0.385	0.133	0.813	< 0.001	< 0.001
组别	例数	CD4⁺Foxp3⁺ Treg	CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	CD4⁺IL17⁺ Th17	Th17/Treg
感染组	86	6.33 ± 1.36	0.75 ± 0.21	3.35 ± 1.38	0.25 ± 0.11
非感染组	54	2.67 ± 1.41	0.29 ± 0.12	0.97 ± 0.61	0.12 ± 0.06
t值	?	－15.154	－16.492	－13.985	－9.036
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表2 两组患者外周血T细胞亚群含量及Treg和Th17细胞含量（ ± s，%）

组别	例数	CD3⁺ T	CD4⁺ T	CD8⁺ T	CD4⁺CD25⁺	CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg
感染组	86	53.11 ± 13.34	43.23 ± 9.89	30.35 ± 8.34	13.11 ± 2.34	2.55 ± 1.34
非感染组	54	55.23 ± 14.56	45.56 ± 8.21	30.69 ± 8.23	6.23 ± 2.56	1.69 ± 1.23
t值	?	0.870	1.509	0.236	－15.991	－1.621
P值	?	0.385	0.133	0.813	< 0.001	< 0.001
组别	例数	CD4⁺Foxp3⁺ Treg	CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	CD4⁺IL17⁺ Th17	Th17/Treg
感染组	86	6.33 ± 1.36	0.75 ± 0.21	3.35 ± 1.38	0.25 ± 0.11
非感染组	54	2.67 ± 1.41	0.29 ± 0.12	0.97 ± 0.61	0.12 ± 0.06
t值	?	－15.154	－16.492	－13.985	－9.036
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表3 两组患者外周血相关因子含量（ ± s，pg/ml）

组别	例数	TGF-β	IFN-γ	IL-10	IL-17
感染组	86	45 781.67 ± 14 276.12	8.24 ± 4.12	121.71 ± 17.86	176.81 ± 19.45
非感染组	54	22 360.45 ± 9 612.87	15.23 ± 3.76	24.67 ± 9.23	61.54 ± 17.35
t值	?	－11.601	10.316	－42.251	－40.310
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表3 两组患者外周血相关因子含量（ ± s，pg/ml）

组别	例数	TGF-β	IFN-γ	IL-10	IL-17
感染组	86	45 781.67 ± 14 276.12	8.24 ± 4.12	121.71 ± 17.86	176.81 ± 19.45
非感染组	54	22 360.45 ± 9 612.87	15.23 ± 3.76	24.67 ± 9.23	61.54 ± 17.35
t值	?	－11.601	10.316	－42.251	－40.310
P值	?	< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

表4 CIN患者感染HPV的多因素Logistic回归分析

影响因素	B值	标准误	Wald值	P值	OR值	95%CI
CD4⁺CD25⁺Treg	1.687	0.356	3.151	0.031	3.673	1.723～5.198
CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg	0.823	0.326	1.147	0.204	2.798	1.238～3.887
CD4⁺Foxp3⁺ Treg	0.587	0.387	2.334	0.078	2.145	1.291～2.764
CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	0.675	0.397	1.786	0.141	2.359	1.526～3.823
CD4⁺IL17⁺ Th17	0.478	0.256	4.125	0.021	1.974	0.511～2.864
Th17/Treg	1.568	0.364	3.908	0.024	3.585	1.986～5.348
TGF-β	0.603	0.319	2.472	0.094	2.163	1.349～3.187
IFN-γ	－0.888	0.179	3.232	0.028	0.612	0.752～3.242
IL-10	0.503	0.253	2.965	0.064	1.108	0.675～1.921
IL-17	0.240	0.287	2.276	0.087	1.272	0.845～1.812

表4 CIN患者感染HPV的多因素Logistic回归分析

影响因素	B值	标准误	Wald值	P值	OR值	95%CI
CD4⁺CD25⁺Treg	1.687	0.356	3.151	0.031	3.673	1.723～5.198
CD8⁺CD25⁺ CD127^－ Treg	0.823	0.326	1.147	0.204	2.798	1.238～3.887
CD4⁺Foxp3⁺ Treg	0.587	0.387	2.334	0.078	2.145	1.291～2.764
CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg	0.675	0.397	1.786	0.141	2.359	1.526～3.823
CD4⁺IL17⁺ Th17	0.478	0.256	4.125	0.021	1.974	0.511～2.864
Th17/Treg	1.568	0.364	3.908	0.024	3.585	1.986～5.348
TGF-β	0.603	0.319	2.472	0.094	2.163	1.349～3.187
IFN-γ	－0.888	0.179	3.232	0.028	0.612	0.752～3.242
IL-10	0.503	0.253	2.965	0.064	1.108	0.675～1.921
IL-17	0.240	0.287	2.276	0.087	1.272	0.845～1.812

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[15]	刘立业, 赵德芳. 非酒精性脂肪肝患者血清细胞因子信号转导抑制因子3、肝X受体α水平与CT影像学特征的相关性[J]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2023, 13(04): 211-215.

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Correlation of human papillomavirus infection among Th17 cell, Treg cell and related cytokines in patients with cervical intraepithelial neoplasia

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