切换至 "中华医学电子期刊资源库"
高级检索
中华实验和临床感染病杂志(电子版)

中华实验和临床感染病杂志(电子版) ›› 2018, Vol. 12 ›› Issue (04) : 402 -408. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-1358.2018.04.017

所属专题： 文献；

论著

不同基因型HBV对药物反应性和S基因突变位点研究
朱杰华1,†(), 黄嘉玲2, 王江林2, 何应中1, 杜文胜1, 黄健1   
  1. 1. 563000　遵义市，遵义医学院附属医院医学检验科
    2. 563099　遵义市，遵义医学院医学检验系医学检验2012级K-1班
  • 收稿日期:2017-10-07 出版日期:2018-08-15
  • 通信作者: 朱杰华
  • 基金资助:
    贵州省联合基金(No.黔科合LH字[2015]7478号)

Drug reactivity and mutations of S gene from different genotypes of hepatitis B virus

Jiehua Zhu1,†(), Jialing Huang2, Jianglin Wang2, Yingzhong He1, Wensheng Du1, Jiang Huang1   

  1. 1. Department of Medical Labotory, Affiliated Hospital of Zunyi Medical University, Zunyi 563000, China
    2. Department of Laboratory Medicine, Zunyi Medical College and Institute of Science and Technology, Zunyi 563099, China
  • Received:2017-10-07 Published:2018-08-15
  • Corresponding author: Jiehua Zhu
  • About author:
    Corresponding author: Zhu Jiehua, Email:
全文 ( ) 下载PDF ( ) 导出引用
引用本文：

朱杰华, 黄嘉玲, 王江林, 何应中, 杜文胜, 黄健. 不同基因型HBV对药物反应性和S基因突变位点研究[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2018, 12(04): 402-408.

Jiehua Zhu, Jialing Huang, Jianglin Wang, Yingzhong He, Wensheng Du, Jiang Huang. Drug reactivity and mutations of S gene from different genotypes of hepatitis B virus[J]. Chinese Journal of Experimental and Clinical Infectious Diseases(Electronic Edition), 2018, 12(04): 402-408.

目的

分析HBV不同基因型对药物反应性及S基因变异情况。

方法

收集遵义医学院附属医院于2016年3月至2017年7月就诊的186例HBV DNA阳性乙型肝炎患者的血清样本，根据是否用药分为治疗组130例和对照组56例，治疗组根据用药不同分为干扰素组、核苷（酸）类似物组、保肝药组和中成药组，分别提取HBV DNA后扩增S基因并测序，结合临床资料分析疗效与基因型相关性。

结果

对照组共51例患者扩增出S基因[91.1%（51/56），其中B基因型30例，C基因型21例]，治疗组共有104例患者样本扩增出S基因[80.0%（104/130），其中B基因型62例，C基因型42例]，均以B、C基因型为主。两种基因型对核苷（酸）类似物的反应性（肝功能改变、HBVDNA拷贝数）与未治疗组差异有统计学意义（P < 0.01）。B基因型HBV S基因经核苷（酸）类似物作用后，第597位碱基鸟嘌呤G变为腺嘌呤A即183位苯丙氨酸（Phe/F）突变为缬氨酸（Val/V），使翻译终止。保肝药和干扰素引起131位鸟嘌呤G突变为腺嘌呤A，进而甘氨酸（Gly/G）变为谷氨酸（Glu/E），且9和213位氨基酸突变率为100%。C基因型HBV则发生26位胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T，即脯氨酸（P）变为亮氨酸（L）及53位点丝氨酸（Ser/S）突变为亮氨酸L。保肝药物作用主要引起68位点异亮氨酸（Ile/I）突变为苏氨酸（Thr/T）和49位点P变L。干扰素和中成药均可引起225位酪氨酸-异亮氨酸（YI）变为异亮氨酸-组氨酸（IH）和9位氨基酸P变L。

结论

不同HBV基因型对药物反应不同，B、C基因型HBV对药物反应可产生相同突变位点。

关键词: 肝炎病毒，乙型, 基因型, S基因, 药物治疗, 变异
Objective

To investigate the different genotypes of HBV on drug reactivity and variation of S gene.

Methods

Total of 186 specimens of hepatitis B patients with HBV DNA positive were collected in Affiliated Hospital of Zunyi Medical University from March of 2016 to July of 2017. According to whether or not using drugs, 186 specimens were divided into experimental group with 130 cases and control group with 56 cases. And the experimental group was divided into interferon group, nucleoside analogue group, hepatoprotective drug group, and Chinese Traditional Medicine group. HBV DNA were extracted and amplified and S gene were sequenced. While the correlation between genotype and clinical treatment were analyzed by clinical data analysis.

Results

S gene were amplified in 91.1% (51/56) samples in untreated group and 80.0% (104/130) samples in experimental group, mainly with B and C genotypes. The reactivity of the two genotypes (the changes of ALT, AST and HBV DNA) were significantly different compared with untreated group (P< 0.01). After reacted with nucleos(t)ide analogues, guanine at the 597th alkaline of S gene in B genotype mutated to adenine, and Phenylalanine (Phe/F) at the 183rd amino acid mutated to valine (Val/V), then translation was terminated. The hepatoprotective drugs and interferon mainly cause the 131st guanine changed to adenine, and Glycine (Gly/G) mutated to glutamic acid (Glu/E), the mutation rate of the 9th and 213rd amino acid were 100%. Among the C genotype, cytosine at the 26th site mutated to thymine, then Proline (Pro/P) mutated to Leucine (Leu/L) and serine (Ser/S) at the 53rd site mutated into Leu. In the hepatoprotective drugs group, Isoleucine mutated to Threonine at the 68th site and P changed into L at the 49th site. Interferon and Chinese Traditional Medicine caused a common mutation with 225 bit Tyrosine-Isoleucine (TI) changing into Isoleucine-Hlstidinein (IH) for both genotype B and C HBV, and the 9th Proline mutated to Leucine.

Conclusions

Different genotypes of HBV showed different reactivity to drugs, genotypes B and C could show the same mutation sites in S gene.

Key words: Hepatitis B virus, Genotype, S gene, Drug treatment, Mutation
表1 HBV S基因引物序列表
基因型 引物 序列号（5＇→3＇） 位点
ABCDE型 F CCTGCTGGTGGCTCCAGTTC nt55～74
ABCDE型 R AAATGTATACCCAAAGACAAAAG nt800～832
FGH型 F TTCCTGCTGGTGGCTCCAGTTCAG nt53～76
FH型 R AATTGGTAACAGCGGTATAAAGGG nt784～807
G型 R GAGAAACGGACTGAGGCCCACTCCC nt641～665
图1 各基因型的同源性
图2 S基因测序结果部分峰图
表2 62例HBV B基因型对不同药物的应答（ ±s）
组别 例数 HBV DNA（× 107 IU/ml） AST（U/L） ALT（U/L）
对照组 30 6.92 ± 3.85 46.21 ± 29.84 42.75 ± 19.13
干扰素治疗组 11 4.19 ± 2.38 162.33 ±18.47b 95.10 ± 34.11
核苷酸类似物治疗组 14 2.45 ± 1.17b 39.87 ± 17.18a 40.50 ± 18.16
中成药治疗组 11 2.59 ± 0.96 84.83 ± 13.60 102.10 ± 52.13
保肝药治疗组 26 3.94 ± 1.14b 86.34 ± 11.79b 117.5 ± 12.83
t值 ? 6.410 0.510 0.158
P值 ? 0.003 2.394 2.112
表3 42例HBV C基因型对不同药物的应答（±s）
组别 例数 HBV DNA（× 107 IU/ml） AST（U/L） ALT（U/L）
对照组 21 6.72 ± 2.85 44.71 ± 23.84 44.72 ± 17.23
干扰素治疗组 11 3.85 ± 1.74 55.30 ± 33.40 104.10 ± 42.57
核苷酸类似物治疗组 10 4.27 ± 1.25 91.20 ± 33.65 159.41 ± 52.72
中成药治疗组 11 7.11 ± 1.57 83.05 ± 37.92 75.75 ± 35.51
保肝药治疗组 10 3.33 ± 1.17 193.31 ± 11.08 113.5 ± 10.80
t值 ? 0.435 2.123 3.113
P值 ? 0.661 0.048 0.511
表4 药物作用后HBV B基因型S基因碱基及氨基（酸）突变位点[例（%）]
碱基突变位点 突变氨基酸 对照组（30例） 保肝药组（25例） 核苷（酸）类似物组（14例） 中药组（11例） 干扰素组（11例）
26C-T P9L 30（100） 25（100） 14（100） 0（0） 11（100）
639A-G I213M 30（100） 25（100） 14（100） 0（0） 11（100）
41T-C V14A 2（7） 4（17） 0（0） 0（0） 0（0）
62T-C L21S 3（10） 5（20） 0（0） 0（0） 5（45）
131G-A G44E 0（0） 4（17） 0（0） 0（0） 4（36）
140T-A V47E 0（0） 0（0） 0（0） 0（0） 3（27）
637插入T IPLLPIFFCLWVYI213YAAVTNFLLSLGIH 0（0） 0（0） 0（0） 0（0） 4（36）
373C-T T125M 0（0） 0（0） 0（0） 0（0） 0（0）
584T-C I195T 0（0） 0（0） 0（0） 2（18） 0（0）
547T-G F183V 0（0） 0（0） 5（35） 0（0） 0（0）
580G-T V194F 0（0） 0（0） 3（21） 0（0） 0（0）
26C-T P9L 30（100） 25（100） 14（100） 0（0） 11（100）
表5 药物作用后HBV C基因型S基因碱基及氨基酸突变位点[例（%）]
突变位点 突变氨基酸 对照组（21例） 保肝药组（10例） 核苷（酸）类似物组（10例） 中药组（11例） 干扰素组（11例）
26C-T P9L 21（100） 10（100） 10（100） 11（100） 11（100）
8A-G N3S 6（29） 0（0） 4（40） 0（0） 0（0）
203T-C I68T 3（14） 3（30） 0（0） 0（0） 0（0）
71G-A R24K 6（29） 0（0） 0（0） 0（0） 0（0）
158C-T S53L 3（14） 0（0） 5（50） 1（10） 0（0）
146C-T P49L 0（0） 4（40） 0（0） 0（0） 1（10）
表6 药物作用后HBV B与C基因型相同突变位点[例（%）]
突变位点 突变氨基酸 对照组（51例） 保肝药组（36例） 核苷（酸）类似物组（24例） 中药组（22例） 干扰素组（22例）
13A-G T5A 3（6.1） 0（0.0） 0（0.0） 3（13.6） 0（0.0）
673InsA YI225IH 9（18.4） 6（17.0） 0（0.0） 12（54.5） 1（4.5）
670G-T 0 4（8.2） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0） 5（22.7）
599A-T Y200F 2（4.1） 2（10.0） 0（0.0） 0（0.0） 0（0.0）
26C-T P9L 13（26.5） 10（27.8） 0（0.0） 3（27.3） 9（40.9）
[1]
Ganem D,Prince AM. Hepatitis B virus infection natural history and clinical consequences[J]. N Engl J Med,2014,350(10):1118-1129.
[2]
樊蓉,孙剑,侯金林. 慢性乙型肝炎抗病毒治疗现状及展望[J]. 临床肝胆病杂志,2016,32(11):2029-2032.
[3]
Ghasemi F,Rostami S,Ghayour-Mobarhan M, et al. Current progress in the development of therapeutic vaccines for chronic hepatitis B virus infection[J]. Iran J Basic Med Sci,2016,19(7):692-704.
[4]
Chen DS. Hepatitis B vaccination: The key towards elimination and eradication of hepatitis B[J]. J Hepatol,2009,50(4):805-816.
[5]
Mobini M,Mortazavi M,Nadi S, et al. Significant roles played by interleukin-10 in outcome of pregnancy[J]. Iran J Basic Med Sci,2016,19(2):119-124.
[6]
Bertoletti A,Ferrari C. Innate and adaptive immune responses in chronic hepatitis B virus infections: towards restoration of immune control of viral infection[J]. Postgrad Med J,2013,89(1051):294-304.
[7]
Liang TJ,Block TM,Brian J, et al. Present and future therapies of hepatitis B: from discovery to cure[J]. Hepatology,2015,62(6):1893-1908.
[8]
Dienstag JL. Hepatitis B virus infection[J]. N Engl J Med,2008,359(14):1486-1500.
[9]
Lok AS,Zoulim F,Locarnini S, et al. Antiviral drug-resistant HBV: Standardization of nomenclature and assays and recommendations for management[J]. Hepatology,2007,46(1):254-265.
[10]
Gu LJ,Han Y,Li YJ, et al. Emergence of lamivudine-resistant HBV during antiretroviral therapy including lamivudine for patients coinfected with HIV and HBV in China[J]. PLoS One,2015,10(8):e0134539.
[11]
Pau AK,George JM. Antiretroviral therapy: current drugs[J]. Infect Dis Clin North Am,2014,28(3):371-402.
[12]
邱宁,李蕊,温春阳, 等. 慢性乙型肝炎患者在核苷(酸)类药物规范化治疗前耐药突变研究[J]. 中国病毒病杂志,2014,4(1):11-14.
[13]
Chen L,Gan QR,Zhang DQ, et al. Increased intrahepatic quasispecies heterogeneity correlates with offtreatment sustained response to nucleos(t)ide analogues in e antigen-positive chronic hepatitis B petients[J]. Clin Microbiol infec,2016.22(2):201-207.
[14]
Isorce N,Lucifora J,Zoulim F, et al. Immune-modulators to combat hepatitis B virus infection: from IFN-alpha to novel investigational immunotherapeutic strategies[J]. Antiviral Res,2015,122:69-81.
[15]
Gish R,Jia J,Locarnini S, et al. Selection of chronic hepatitis B therapy with high barrier to resistance[J]. Lancet Infect Dis,2012,12(4):341-353.
[16]
Cai WJ,Yin L,Wang SL, et al. Correlation between polymorphisms of the E-selectin gene, hepatitis B virus DNA copies, pre-S1 antigen and clinical outcomes during chronic hepatitis B[J]. Int J Clin Exp Med,2015,8(2):2893-2898.
[17]
Makvandi M. Update on occult hepatitis B virus infection[J]. World J Gastroenterol,2016,22(39):8720-8734.
[18]
Zhang ZH,Wu CC,Chen XW, et al. Genetic variation of hepatitis B virus and its significance for pathogenesis[J]. World J Gastroenterol, 2016,22(1):126-144.
[19]
Rodriguez-Frias F,Buti M,Tabernero D, et al. Quasispecies structure, cornerstone of hepatitis B virus infection: Mass sequencing approach[J]. World J astroenterol,2013,19(41):6995-7023.
[20]
Wang YW,Shan XF,Liang Z, et al. Deep sequencing analysis of HBV genotype shift and correlation with antiviral efficiency during adefovir dipivoxil Therapy[J]. PLoS One,2015,10(6):e0131337.
[21]
杨柳. 乙肝病毒基因型及基因变异特征分析的研究[J]. 中国优生与遗传杂志,2015,23(5):9-19.
[22]
王丽丽,杨兴林,吴君, 等. 贵州地区269例慢性乙型肝炎患者病毒基因型与耐药分析[J]. 实用医学杂志,2016,32(23):3874-3878.
[23]
Sun HY,Sheng WH,Tsai MS, et al. Hepatitis B virus coinfection in human immunodeficiency virus-infected patients: A review[J]. World J Gastroenterol,2014,20(40):14598-14614.
[24]
Zhang ZH,Zhang L,Dai Y, et al. Occult hepatitis B virus infection: influence of S protein variants[J]. Virology,2016,13(10):50-61.
[1] 段燕, 郭欣, 吕慧芳, 王国利, 黄明光, 董英俊. 乳腺癌患者辅助化疗后感染肺孢子菌一例[J]. 中华乳腺病杂志(电子版), 2023, 17(05): 318-321.
[2] 中华医学会骨科学分会关节外科学组, 广东省医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会, 广东省佛山市顺德区第三人民医院. 中国髋部脆性骨折术后抗骨质疏松药物临床干预指南(2023年版)[J]. 中华关节外科杂志(电子版), 2023, 17(06): 751-764.
[3] 董晓燕, 赵琪, 唐军, 张莉, 杨晓燕, 李姣. 奥密克戎变异株感染所致新型冠状病毒感染疾病新生儿的临床特征分析[J]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(05): 595-603.
[4] 江泽莹, 王安婷, 王姣丽, 陈慈, 周秋玲, 黄燕娟, 周芳, 薛琰, 周剑烽, 谭文勇, 杜美芳. 多种植物油组分预防肿瘤放化疗相关毒性反应的效果分析[J]. 中华损伤与修复杂志(电子版), 2023, 18(06): 523-527.
[5] 李维, 莫俊俏. 儿童呼吸道耐药流感嗜血杆菌基因型鉴定及耐药分析对抗菌药物治疗选择的意义[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2023, 17(05): 315-323.
[6] 王迎迎, 谢平. 乙型肝炎病毒感染合并肺结核患者发生肝损伤的危险因素及预测模型构建[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2023, 17(04): 267-273.
[7] 汪必涛, 王征, 王国斌. 林奇综合征的治疗现状及进展[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(03): 332-335.
[8] 陈淑钿, 梁韵, 廖媛, 王杨. 补体C3在HBV相关慢加急性肝衰竭患者预后评估中的价值[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2023, 12(05): 562-566.
[9] 王建奇, 陈政良, 刘雨, 俞星新, 耿志达, 姜洪池, 梁英健. 基于160例患者CT三维重建的肝血管解剖变异分析[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2023, 12(04): 427-433.
[10] 刘德海, 刘一昀, 蓝倩倩, 孙彤, 边林博, 秦锐, 邱磊, 周一凡, 齐虹. 老视药物疗法的研究进展[J]. 中华眼科医学杂志(电子版), 2023, 13(03): 177-182.
[11] 许秀兰, 朱建建. 血压变异性与伴H型高血压的急性脑梗死患者预后不良的临床关系分析[J]. 中华脑科疾病与康复杂志(电子版), 2023, 13(04): 199-204.
[12] 戴俊, 李硕, 曹影, 汪守峰, 宋红毛, 蔡菁菁, 邵敏, 陈莉, 程雷, 怀德. 鼻内镜下改良高选择性翼管神经低温等离子消融术对中重度变应性鼻炎的效果研究[J]. 中华临床医师杂志(电子版), 2023, 17(06): 689-693.
[13] 孔倩文, 刘姗, 曾彩虹, 曾庆春. 有氧运动和抗阻运动对心力衰竭患者心率变异性影响的观察性研究[J]. 中华心脏与心律电子杂志, 2023, 11(03): 160-164.
[14] 杨海华, 袁景林, 周晓梅, 牛军伟. RNF213基因突变所致烟雾病一家系病例临床分析并文献复习[J]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2023, 17(05): 495-498.
[15] 刘琳, 张奇山, 廖蔓倩, 陈余榕, 李倍, 何玉成, 唐圣桃. HTRA1相关常染色体显性脑小血管病家系报告并文献复习[J]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2023, 17(04): 379-385.
阅读次数
全文


摘要

版权所有 中华医学会 中华医学电子音像出版社有限责任公司  京ICP备14006079号-1  网络出版服务许可证：(署)网出证(京)字第075号